現實生活中,我們可以通過開窗通風、佩戴口罩等防護用品來降低氣溶膠傳播風險。類似地,目前PCR實驗室主要通過以下措施來防范和控制實驗室污染:
(1)建設獨立的PCR實驗室,按試劑準備區、樣本制備區、擴增及產物分析區進行嚴格分區,把低污染風險操作和高污染風險操作在空間上隔離開來。
(2)打造專門的負壓通風系統,控制實驗室空氣從低風險區向高風險區單向流動,避免保存試劑被一次性全部污染。
(3)制定嚴格的實驗室管理條例,控制人員物品單向流動,要求操作人員全程嚴格進行360度無死角全身防護。

(4)抬高實驗人員門檻,需要經過上級單位規范培訓、考核并獲得“PCR上崗證”的人員方能上崗工作。
(5)PCR反應液分裝保存,減少重復加樣次數,降低試劑被污染風險。
(6)在PCR試驗中加入內標、陰陽性對照等質控,監測檢測結果,避免出現假陰性或假陽性。
(7)實驗室溫度控制在18~27℃,濕度控制在30%~70%。
(8)定期使用75%乙醇、含氯消毒劑和核酸去除劑及紫外線照射進行消毒等。







(1)滲漏密閉性:將n個PCR管加入半量墨汁,蓋好蓋子后放入水中,浸泡30min,沒有墨汁滲出為合格。
(2)離心密閉性:將n個PCR管加入半量純水,放入離心機,1000 rpm,30min,管蓋未崩開未漏液為合格。
(3)熱密閉性:將n個PCR管加入半量純水,蓋好蓋子稱重后放入PCR儀,設置一個常用的PCR程序,程序運行完畢后,再進行稱重,PCR管未變形,管蓋未崩開未漏液,前后重量未變化為合格。
(4)冷密閉性:將n個PCR管加入半量純水,放入-20℃冰箱,24h,離心管未變形,管蓋未崩開未漏液為合格。
(5)污染物質檢:將n個PCR管加入半量陰性純水,蓋好蓋子渦旋1 min后靜置5min,作為模板進行擴增,qPCR無擴增為合格。
(6)抑制物質檢:將n個PCR管分別加入弱陽性質控物,室溫靜置5min,然后進行提取;RNA核酸,DNA核酸,室溫靜置5min,作為模板進行擴增,qPCR擴增未被抑制為合格。

(7)空白熒光通透性:對于qPCR,需要考察PCR管是否有非特異性熒光信號,將n個空PCR管,蓋好蓋子后放入PCR儀,設置一個常用的PCR程序,程序運行完畢后,qPCR無擴增為合格。
(8)陽性熒光通透性:對于qPCR,還需要考察PCR管是否會抑制熒光的通透性,將n個含弱陽性樣品和擴增試劑的PCR管,與確認無熒光干擾的PCR管,蓋好蓋子后放入PCR儀一同擴增,設置一個常用的PCR程序,程序運行完畢后,qPCR擴增未被抑制為合格。
(1)嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室,有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個實驗區的門;
(2)盡量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉污染的可能性。
(3)擴增產物分析區是的擴增產物污染來源,廢液不能在實驗室中傾倒,必須經消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉,用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒后統一處理,如焚燒等;

(4)擴增產物分析區可能會用到某些可致基因突變和有毒物質,應特別注意實驗人員的安全防護。 3.5完備的實驗室配套設施
完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件,應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器,如超凈工作臺、離心機、加樣器等。